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  • 生物血清離心機的使用建議
  • 2018/5/7 閱讀次數:[694]
  • 1、 血清必須貯存-20℃,如存放于4℃,請勿超過兩周,對于某些單位一次無法用完一瓶,可在無菌條件下將其40-45分裝于無菌50ml離心管中,由于血清解凍時體積會增加10%,必須預留此膨脹體積的空間,否則易發生污染或容器凍裂的情形。
     
    2、 血清一般為200ml和400ml裝量,因此我們建議您在使用中宜采取逐步解凍的方法解凍血清:-20℃→4℃冰箱或冷庫溶解24小時→室溫下全溶后再分裝,一般以50 ml無菌離心管中分裝40-45 ml。強烈建議您在使用過程中,必須規則地將血清搖晃均勻,小心勿造成氣泡,使溫度與成分均一,減少沉淀的發生。勿直接由-20℃放置至37℃環境下解凍,因為溫度改變太大,溶易造成蛋白質凝結而產生沉淀。
     
    3、 血清的滅活(heat-inactivation)一般是指56℃,30分鐘水浴加熱已完全解凍的血清,加熱過程中必須規則地搖晃均勻。此處理的目的是使血清中的補體成分(complement)去活化。但是,經過滅活處理的血清會因而造成沉淀的顯著增多,且會影響血清的品質。所以,細胞培養用牛血清不做滅活處理。而診斷試劑用血清在除菌過濾前進行過滅活處理。
     
    4、 在使用血清的時候,勿將血清留置于37℃太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩定的成分會因而受到破壞,影響血清的品質。
     
    5、 高融合細胞培養用小牛血清和標準型細胞培養用小牛血清均需采用100納米濾器連續三次去除支原體的無菌過濾。若在血清產品中發現懸浮物,除非必須去除,建議將血清加入培養基內一起過濾,勿直接過濾血清。
     
    6、 血清的沉淀物
     6.1 凝絮物:其產生的原因有多種,但普遍的原因是血清中的脂蛋白(lipoprotein)變形及解凍后血清中存在的纖維蛋白(fibrin)造成,這些凝絮沉淀物不會影響血清本身的品質。除非必須減少這些沉淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后取上清液加入培養基中一起除菌過濾。
     
    2 顯微鏡下觀察“小黑點”,通常經過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為是血清遭受污染,而將血清放置在37℃中欲培養此“微生物”,但37℃環境下,又會使此沉淀物增多,更會誤認為微生物的增殖,但以培養細菌的培養基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點不會影響細胞的生長。
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